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人血栓前体蛋白(TpP)ELISA检测试剂盒操作说明!
发布时间:2021-09-06   点击次数:69次

人血栓前体蛋白(TpP)ELISA检测试剂盒操作说明!

产品名称:人血栓前体蛋白(TpP)ELISA检测试剂盒

规格:96T

储存:2-8℃,避光防潮保存。

有效期:6个月

试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被人血栓前体蛋白(TpP)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人血栓前体蛋白(TpP)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。

操作步骤:

1.  从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2.  设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;

3.  待测样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;

4.  随后标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5.  弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。

6.  每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

7.  每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。

注意事项:

1. 试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。

2.  实验中不用的板条应马上放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。

3.  预处理后的样本无需稀释,直接取10μL加样即可。

4.  严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

5.  所有液体组分使用前充分摇匀。







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