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高铁血红蛋白(MetHb)测试盒如何正确使用
发布时间:2021-04-21   点击次数:141次

 高铁血红蛋白(MetHb)测试盒如何正确使用

 

上海信帆生物供应 高铁血红蛋白(MetHb)测试盒,产品质量稳定,备有大量现货。

 

高铁血红蛋白(MetHb)测试盒说明书

 

一、实验仪器:试管、微量移液器、旋涡混匀器、可见分光光度计(540602630nm

二、适用范围:本试剂盒可测各种动物全血等样本中高铁血红蛋白含量;

三、测定意义:体内一氧化氮弥散入血后,很快与氧合血红蛋白结合形成高铁血红蛋白(methemoglobin, MetHb),NOMetHb变化相关,故全血MetHb检测近年来受到临床的广泛重视。同时血液中高铁血红蛋白含量的测定对接触芳香族氨基、硝基化合物所引起的中毒性疾病的诊断与治疗,有重要的意义。

四、试剂组成及配制

     A.试剂一:血红蛋白测定浓缩液,1ml X 2,2—8℃保存。

               血红蛋白测定应用液的配制:临用前将浓缩液用双蒸水1:99稀释,即100倍稀释,现用现配。配好的试剂2—8℃避光保存,可存放一个月以上。

     B.试剂二: 高铁血红蛋白测定浓缩液,30ml X 1瓶,2—8℃。

              高铁血红蛋白测定应用液的配制:  浓缩液:双蒸水=1:9稀释,即10倍稀释,可存放6个月以上。

     C.试剂三:制作还原血红蛋白曲线用

              ① 白色粉剂 X 1支,2—8 ℃避光保存。

              ② 稀释液,1ml X 1支,2—8 ℃保存。

              试剂三应用液配制:临用前每支粉剂加入1ml稀释液,现用现配,注意避光。

     D.试剂四:制作高铁血红蛋白曲线用

              ① 砖红色粉剂 X 1支,2—8℃避光保存。

              ② 稀释液,1ml X 1支,2—8℃保存。

              试剂四应用液配制:临用前每支粉剂加入1ml稀释液,现用现配,注意避光

五、操作过程:

1、制备抗凝全血:取全血马上加入到肝素抗凝管内,加盖封口,轻轻颠倒混匀。

2、血红蛋白含量的测定:取 0.01ml 全血与 2.5ml 100 倍稀释的试剂一应用液(血红蛋白测定应用液),混匀,静置5分钟后,1cm光径,双蒸水调零,540nm处测定各管吸光度值。

3、高铁血红蛋白测定: 0.05ml全血,加入2.5ml的试剂二稀释应用液(即高铁血红蛋白测定应用液),混匀,静置5分钟后,1cm光径,双蒸水调零,测定630nm处及602nm处吸光度值。如果没有双波长的分光光度计则可以先测定各管630nm处吸光度值,然后再测各管602 nm处吸光度值。但一定要注意各管的编号不要弄错。

六、计算公式:

、血红蛋白含量的计算:血红蛋白克数/=540nm处吸光度值×367.7

、高铁血红蛋白百分比计算: MetHb% = (A630nmr x A602nm)÷(A602nm x(R r)) ×100%

、高铁血红蛋白含量的计算:高铁血红蛋白克数 / = MetHb%×血红蛋白克数/

【注1 A630即在630nm波长时样本的吸光度值;A602即在602nm波长时样本的吸光度值

【注2 Rr均为常数,R=1.81r=0.14。(本研究所测定常数)

即计算公式可以简化为:

、高铁血红蛋白百分比: MetHb% = (A630nm0.14×A602nm) ÷(A602nm ×1.67) ×100%

、高铁血红蛋白含量的计算:高铁血红蛋白克数/ = MetHb%×血红蛋白克数 /

 

 高铁血红蛋白(MetHb)测试盒如何正确使用

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